En
Register Log in
  1. Main
  2. Conference
  3. Fundamental and applied research for key propriety...
  4. Optimization of Protocols for Isolation and Cultiv...

Optimization of Protocols for Isolation and Cultivation of Cells of Various Topographic Areas of Human Skin

Proceeding
DOI: 10.31483/r-102248
Open Access
All-Russian scientific conference with International Participation «Fundamental and applied research for key propriety areas of bioecology and biotechnology»
Creative commons logo
Published in:
All-Russian scientific conference with International Participation «Fundamental and applied research for key propriety areas of bioecology and biotechnology»
Authors:
Marita R. Kiiamova 1 , Elena I. Antonova 1 , Natalia V. Firsova 1 , Natal'ia A. Lengesova 1 , Uliana A. Bezrukova 2 , Sergei V. Sikharulidze 3
Work direction:
Биомедицинские технологии
Pages:
107-116
Received: 29 April 2022

Rating:
Article accesses:
1060
Published in:
РИНЦ
1 Nauchno-issledovatel'skii tsentr fundamental'nykh i prikladnykh problem bioekologii i biotekhnologii FGBOU VO "Ul'ianovskii gosudarstvennyi pedagogicheskii universitet im. I.N. Ul'ianova"
2 Ulyanovsk State Pedagogical University named after I. N. Ulyanov
3 Mnogoprofil'naia bol'nitsa "VM-klinik"
For citation:
Kiiamova M. R., Antonova E. I., Firsova N. V., Lengesova N. A., Bezrukova U. A., & Sikharulidze S. V. (2022). Optimization of Protocols for Isolation and Cultivation of Cells of Various Topographic Areas of Human Skin. Fundamental and applied research for key propriety areas of bioecology and biotechnology, 107-116. Чебоксары: PH "Sreda". https://doi.org/10.31483/r-102248

Abstract

На основе анализа протоколов отечественных и зарубежных исследований оптимизированы протоколы выделения и культивирования цитотипов различных топографических участков кожи человека с учётом количества выделенных клеток и сроков формирования монослоя. Определены – оптимальный период работы с биоптатом с момента забора материала до введения его в работу, режим культивирования клеток и наиболее эффективный вариант механической и ферментативной дезагрегации биоптата кожи. Данная работа проводится в качестве начального этапа для дальнейшего изучения реактивности цитотипов кожи (фибробласты и меланоциты) в системе in vitro в ответ на внешние воздействия, такие как ультрафиолетовое облучение, в рамках проекта по изучению онкогенеза меланомы.

References

  1. 1. Антонова Е.И. Клеточные линии меланоцитов и их биология при меланоме / Е.И. Антонова, С.А. Бармина, Е.С. Волкова, О.М. Костина // Научное обозрение. Педагогические науки. – 2019. – №5 (2). – С. 15–18.
  2. 2. Джуссоева, Е.В. Изучение функциональной активности меланоцитов, культивированных in vitro в 2D и 3D условиях: автореф. дис. ... канд. биол. наук: 14.03.03. – М., 2020. – 27 с.
  3. 3. Доклад Министра здравоохранения Скворцовой В.И. на заседании Коллегии Минздрава РФ «Об итогах работы Министерства в 2014 и задачах на 2015 год [Электронный ресурс]. – Режим доступа: https://www.rosminzdrav.ru/news/2015/04/15/2300-ministr-veronika-skvortsova-vystupila-na-kollegiiminzdrava-rossiiobitogah-raboty-ministerstva-v-2014-godu-i-zadachah-na-2015-god
  4. 4. Колокольцова Т.Д. Современные способы выделения и культивирования клеток человека и животных: учебное пособие / Т.Д. Колокольцова, И.Н. Сабурина, А.А. Кубатиев. – М., 2016. – 50 с.
  5. 5. Крылова, Т.А. Получение и характеристика неиммортализованных клеточных линий дермальных фибробластов человека, выделенных из кожи век взрослых доноров разного возраста / Т.А. Крылова, А.С. Мусорина, В.В. Зенин, [и др.] // Цитология. – 2016. – Т. 58. №11. – С. 850–864.
  6. 6. Озерская О.С. Экспериментальные подходы к обоснованию применения клеточных композиций на основе фибробластов в дерматокосметологии / О.С. Озерская, В.В. Щеголев // Клеточная трансплантология и тканевая инженерия. – 2008. – Т. 3. №2. – С. 66–67.
  7. 7. Пинаев Г.П. Клеточная биотехнология: учебно-метод. пособ. / Г.П. Пинаев, М.И. Блинова, Н.С. Николаенко [и др.]. – СПб., 2011. – 209 с.
  8. 8. Фадеев Ф.А. Адгезия фибробластов кожи человека на модифицированном для применения в имплантологии титане с анодированным нанотрубчатым покрытием / Ф.А. Фадеев, Ю.Я. Хрунык, С.В. Беликов [и др.] // Доклады Академии Наук. – 2019. – Т. 486. №1. – С. 123–126.
  9. 9. Фадеев Ф.А. Разработка и оптимизация технологии автоматизированного культивирования клеточных линий для терапевтического применения / Ф.А. Фадеев, А.В. Сулимов, А.В. Штукатуров [и др.] // Сборник научных работ. Клеточные технологии – практическому здравоохранению / под общ. ред. проф. Леонтьева С.Л. – Екатеринбург: Вестник Уральской медицинской академической науки – 2016. – С. 68–73.
  10. 10. Федеральный закон «О биомедицинских клеточных продуктах» от 23 июня 2016 г. №180-ФЗ (с изменениями и дополнениями от 3 августа 2018 г., 27 декабря 2019 г.).
  11. 11. Фрешни Р.Я. Культура животных клеток: практическое руководство. пер. 5-го англ. изд. – М.: БИНОМ. Лаборатория знаний, 2010. – 691 с.
  12. 12. Черкасова Е.И. Работа с культурами клеток: учебно-метод. пособ. / Е.И. Черкасова, А.А. Брилкина. – Н. Новгород, 2015. – 57 с.
  13. 13. Banakh I. A comparative study of engineered dermal templates for skin wound repair in a mouse model / I. Banakh, P. Cheshire, M. Rahman [et al.] // Int. J. Mol. Sci. – 2020. – 21 (12). – P. 2–15.
  14. 14. Bertolotti A. Assessment of non-cultured autologous epidermal cell grafting resuspended in hyaluronic acid for repigmenting vitiligo and piebaldism lesions: a randomized clinical trial / A. Bertolotti, G. Leone, A. Taïeb [et al.] // Acta Derm Venereol. – 2021. – 101 (7). – P. 1–7.
  15. 15. Carvalhães J.L. The effect of aging in primary human dermal fibroblasts / J.C. Lago, M.B. Puzzi // PLoS One. – 2019. – 14 (7). – P. 1–14.
  16. 16. Castell J.V. Liver cell culture techniques / J.V. Castell, M.J. Gomes-Lechon // Hepatocyte transplantation. – 2009. – P. 35–46.
  17. 17. Chen R. Dedifferentiation of human epidermal melanocytes in vitro by long-term trypsinization / R. Chen, L. Xiao, R.Z. Zhang [et al.] // Cell Tissue Bank. – 2021. – 22 (1). – P. 67–75.
  18. 18. Cunningham D.E. Blocking resolution. How external states can prolong civil wars // J. Peace Res. – 2010. – V. 47. №2. – P. 115–127.
  19. 19. Fernandes I.R. Fibroblast sources: Where can we get them? / I.R. Fernandes, F.B. Russo, G.C. Pignatari [et al.] // Cytotechnology. – 2016. – 68(2). – P. 223–228.
  20. 20. Francesco F.D. Non-Enzymatic Method to obtain a fat tissue derivate highly enriched in adipose stem cells (ASCs) from human lipoaspirates: preliminary results / F.D. Francesco, S. Mannucci, G. Conti [et al.] // Int. J. Mol. Sci. – 2018. – V. 19. №7. – P. 2061.
  21. 21. Freshney R. Cell line provenance // Cytotechnology. – 2002. – 39. – P. 55–67.
  22. 22. Fusenig N. Culture of keratinocytes on collagen gels and use of transplantation chambers for grafting onto mouse skin. In: «Keratinocyte methods» ed by Leigh I.M. and Watt F.M // Cambrige University Press. – 1994. – P. 57–61.
  23. 23. Herlyn M. Characteristics of cultured human melanocytes isolated from different stages of tumor progression / M. Herlyn, J. Thurin, G. Balaban [et al.] // Cancer Research. – 1985. – 45. – P. 5670–5676.
  24. 24. Hirata E. Tumor Microenvironment and differential responses to therapy / E. Hirata, E. Sahai // Cold Spring Harb. Perspect. Med. – 2017. – 7 (7). – P. 1–14.
  25. 25. Janik K. Efficient and simple approach to in vitro culture of primary epithelial cancer cells / K. Janik, M. Popeda, J. Peciak [et al.] // Biosci. Rep. – 2016. – 36 (6).
  26. 26. Liu C. Y-27632 enriches the yield of human melanocytes from adult skin tissues / C. Liu, S. Wang, M. Liu [et al.] // Biology. – 2020. – P. 1–5.
  27. 27. McNeal A. BRAFV600E induces reversible mitotic arrest in human melanocytes via microRNA-mediated suppression of AURKB Cancer Biology / A. McNeal, R.L. Belote, H. Zeng [et al.] // Genetics and Genomics. – 2021. – С. 1–20.
  28. 28. Shevchenko E.K. Transplantation of modified human adipose derived stromal cells expressing VEGF165 results in more efficient angiogenic response in ischemic skeletal muscle / E.K. Shevchenko, P. Makarevich, Z. Tsokolaeva [et al.] // Journal of Translational Medicine. – 2013. – 11 (138). – P. 1–18.

Comments(0)

When adding a comment stipulate:
  • the relevance of the published material;
  • general estimation (originality and relevance of the topic, completeness, depth, comprehensiveness of topic disclosure, consistency, coherence, evidence, structural ordering, nature and the accuracy of the examples, illustrative material, the credibility of the conclusions;
  • disadvantages, shortcomings;
  • questions and wishes to author.